在眾多犬類疾病中,犬細小病毒病堪稱對犬類威脅大的一類疾病。很多寵物主人都是因為此類疾病失去愛寵。同時此類疾病的傳染性極強,如果犬舍沒有良好的管理、消毒和隔離措施,很有可能對犬舍造成極大的損失。所以,抗擊犬細小病毒是人類一直以來都在努力研究的課題,下面我們通過大連三儀生物工程研究所的藥物臨床,進一步了解如何抗擊犬細小病毒病對犬類造成的傷害。
將人工感染發病的30只未免疫犬只隨機分成3組,進行不同藥物組合的治療比較試驗,在治療實驗第7天,比較體征、病程,以判定治療效果。結果表明:轉移因子、干擾素聯合抗生素等藥物的治療,其治愈率為50%,有效率為80%,明顯高于轉移因子、免疫球蛋白聯合抗生素組和血清治療組,而且轉移因子、干擾素聯合抗生紊等藥物治療平均治愈時間較短。干擾素作為早期預防經人工感染發病時間延遲,說明干擾素具有預防病毒病的作用。
動物轉移因子(transfer factor,TF)是一種具有較強免疫活性的小分子物質,由于其抗原特異性和多方面的非特異性免疫功能,具有廣泛的免疫學活性。國內醫學界對不同動物TF在疾病預防方面的作用也做了大量的研究工作。大量研究表明其在防治動物傳染病、增強機體免疫力等方面的效果確實可靠。國內20世紀80年代初,TF已經被試用于畜禽(豬、牛、馬、雞、鴨、鵝等)的某些病毒、細菌和真菌等感染性疾病的治療,并取得了一定的效果。TF在獸醫臨床上的應用,主要表現在疫病的治療、免疫佐劑、免疫輔助治療等幾個方面。劉潤珍(1996)等應用豬脾細胞特異性TF對犬等動物的細小病毒腸炎和犬瘟熱病進行治療,效果顯著。干擾素是細胞受到病毒感染或者受核酸、細菌內毒素、促細胞分裂素等作用后,由受體細胞分泌的糖蛋白。這種具有高度生物活性的糖蛋白能夠干擾病毒的繁殖,此外還具有免疫調節和抗腫瘤等生物活性。干擾素與細胞表面受體結合,誘導細胞產生多種抗病毒蛋白,抑制病毒在細胞內繁殖。提高免疫功能包括增強巨噬細胞的吞噬功能、增強淋巴細胞對靶細胞的細胞毒性和天然殺傷性細胞的識別功能。因此,本次試驗采用TF、干擾素聯合抗生素等藥物治療人工感染犬細小病毒,并通過觀察治療結果來研究其在犬病毒病治療方面的效果。
一、材料與方法
(一)材料
1、干擾素、轉移因子、免疫球蛋白;
2、犬細小病毒強毒;
3、犬用細小病毒、犬瘟熱單抗;
4、犬細小病毒快速診斷試紙;
5、健康未免疫犬(選取2—3個月齡左右的健康、品種純度交高的犬30只);
(二)方法
1、人工感染健康未免疫犬
對健康未免疫犬用犬細小病毒強毒攻擊,每只狗在相同時間內攻入相同劑量的細小病毒,3天后,30只健康雜種犬中,有9只出現典型犬細小病毒臨床癥狀(體溫升高至39.2—41℃精神沉郁,食欲廢絕,嘔吐,腹瀉,拉血便等),實驗室檢測(犬細小病毒、犬瘟熱快速診斷試紙)確診為犬細小病毒病與犬瘟熱混合感染。
2、發病犬分組
人工感染發病的未免疫犬隨機分成3組(A組、8組、C組),每組10只進行不同藥物組合的治療比較試驗。但A組在攻毒前先口服干擾素作為預防,B組、C組作為對照,不做預防。考察干擾素臨床上的預防效果。
治療方案為:
A組注射TF+注射干擾素+抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療;
B組注射TF+注射免疫球蛋白+抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療;
C組注射犬用細小病毒單抗+注射抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療;
3、治療藥物與方法
(1)補液(支持療法):
【細小病毒】
①0.9%生理鹽水,氨芐西林鈉;
②O.9%生理鹽水,碳酸氫鈉;
③復方鹽水,ATP,COA,肌苷,維生素C,慶大。
④葡萄糖氯化鈉,止血敏。
【犬溫熱病】
①鹽水,雙黃連粉針;
②葡萄糖氯化鈉,ATP,COA,維生素C,頭孢曲松鈉(單走),利巴韋林;
(2)犬用單抗治療劑量按1ml/kg,皮下注射或肌肉注射,連用5—7天。
(3)TF、干擾素、免疫球蛋白療法:5ml/次(10IU),皮下注射,每天1—2次,連用3—5天。
(4)對癥療法:止吐用溴米納普魯卡因,皮下注射;健胃用胃復安2ml;退燒用復方氨林巴比妥、清開靈,每天一次,可根據每日體溫情況;止瀉可選用寵物寶;對病危時出現心衰癥狀使用異丙腎上腺素與酚妥拉明。
(5)測量體溫:每天早晚測量體溫1次,觀察分析治療效果(包括犬的體溫、排便、精神狀態等)和治愈所需時間,并進行詳細記錄。在治療后的第7天,判定和比較各組患病犬的臨床癥狀、病程進展和治療效果。
分析整理結果,將痊愈和顯效者列為有效病例,統計出有效率,并比較各組治愈所需時間的差異。
(三)療效判定標準
1、痊愈用藥后臨床癥狀消失,即體溫、精神、食欲恢復正常,血便停止、糞便成形,小便正常等。
2、顯效用藥后臨診癥狀、體溫、精神、食欲均恢復正常,但糞便尚未成形或體溫、精神恢復正常,但食欲不振和糞便未成形等。
3、無效用藥后臨床癥狀無改善或惡化、死亡。
二、結果
人工感染發病的健康未免疫犬
1、注射TF+注射用干擾素+抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療(A組),7天內治愈5只,顯效3只,共計有效8只,有效率為80%,平均每只患犬治愈時間為5.25天。
2、注射TF+注射免疫球蛋白+抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療(B組),7天內治愈2只,顯效3只,共計有效5只,有效率為50%,平均每只患犬治愈時間為5.83天。
3、注射犬用單抗+注射抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療組(C組),7天內治愈1只,顯效2只,共計有效3只,有效率為30%,7天內未有患犬治愈,平均每只患犬治愈時間為8天。
三、討論
(一)犬細小病毒病主要感染犬,各種年齡和品種的犬均易感,2—4月齡幼犬易感性強,病死率也高。目前,臨床上多采用獸醫常規血清等其他藥物進行對癥治療和支持療法,療效一般。據1990年10月全國第一次犬貓疾病學術研討會資料,細小病毒病、犬瘟熱、犬冠狀病毒病3種犬病毒病中,以犬細小病毒病為嚴重,是對我國目前犬業危害極大的疫病之一,并且家庭飼養寵物往往治療時間較長,治療費用也比較昂貴。
(二)在人工感染的同時,用犬瘟熱檢測試紙來檢測,出現弱陽性,則后判斷為細小病毒和犬瘟熱混合感染,主要以細小病毒為主,所以臨床表現較嚴重,死亡速度比單獨感染細小病毒的速度快。
(三)C組試驗:注射犬用細小病毒、犬瘟單抗+注射抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療,是現在獸因臨診常用于治療犬細小病毒病的方法,給發病犬注射含有特異性抗體,特異性抗體在清除細胞外病毒時的作用無庸置疑,發病早期使用特異性抗體有積極的治療價值。但是通常當犬出現病毒病的一些早期臨床癥狀時,其體內不僅在細胞外存在大量的病毒粒子,細胞內同樣含有大量的病毒粒子,并且細胞內大量的病毒粒子是導致犬出現臨床癥狀的根本原因。
結果表明,在C組治療的1O只人工感染發病的健康未免疫犬中,經7天治療統計,發病犬1只治愈,顯效2只,有效率為30%,治愈3只人工感染發病犬共需時間24天,平均每只治愈時間為8天,注射犬用五聯血清聯合治療組,發揮了一定的作用。但要使患病犬痊愈還需要做進一步治療。
(四)B組實驗:TF+免疫球蛋白+抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療,早期給發病犬注射特異性抗體免疫性球蛋白只能清除機體細胞外病毒粒子,防止正常細胞被進一步感染,緩解病犬臨床癥狀,但要治愈犬病毒病就必須充分激活機體細胞免疫反應,清除細胞內病毒粒子。TF是由供體動物的免疫器官《脾、淋巴結等)組織細胞,通過人工提取出來的一種新型細胞免疫增強劑,主要含有的核苷酸、多肽和氨基酸等,是由免疫活性淋巴細胞(T淋巴細胞)合成的一種具有能轉移致敏信息的淋巴因子,可激發和動員受體動物自身免疫系統,增強免疫功能,戰勝疫病,即通過激發患犬的細胞免疫功能,消滅潛伏病原,達到治愈的目的。
結果表明,經臨床試驗在B組治療的10只人工感染發病的健康未免疫犬中,經7天治療統計,治愈3只(占30%),顯效3只(占30%),共計有效率為60%,治愈的6只人工感染發病犬共需時間35天,平均每只治愈時間為5.83天,對抗菌和抗病毒藥物等聯合治療無法控制或治愈的部分患犬,用TF和免疫球蛋白注射犬用五聯血清共同發揮了一定的作用。因特異性的免疫球蛋白作用具有專一性。
(五)A組實驗:TF+干擾素+抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療,是作用快、療程短和提高療效更為理想的方法。干擾素與細胞表面受體結合,誘導細胞產生多種抗病毒蛋白,抑制病毒在細胞內繁殖,提高免疫功能包括增強巨噬細胞的吞噬功能,增強淋巴細胞對靶細胞的細胞毒性和天然殺傷性細胞的識別功能,能夠干擾病毒的繁殖,此外還具有免疫調節和抗腫瘤等生物活性。尤其基因工程干擾素還具有廣泛抗病毒、抗腫瘤及免疫調節功能。在治療犬病過量或長期使用抗生素,或使用一些抑制過敏反應的激素,都會造成機體免疫功能受抑制,影響疫病的療效,而干擾素與TF聯合使用時,淋巴細胞轉化顯著增加,大大提高了機體的免疫力,而干擾素又同時抑制病毒的擴增,干擾素和TF可部分地拮抗某些藥物的免疫抑制作用,同時可相互協調,共同促進免疫功能的提高。
結果表明,在A組治療的1O只人工感染發病的健康未免疫犬中,經7天治療統計,治愈5只(占50%),顯效3只(占30%),共計有效率為80%,治愈的8只自然發病犬共需時間42天,平均每只治愈時間為5.25天。
由此可見,注射犬用五聯血清+抗菌和抗病毒藥物等聯合治療無法控制或治愈的患犬,轉移因子和干擾素共同發揮了重要作用。在臨床上未見有太多報道關于轉移因子和干擾素二者配合使用。但本試驗研究TF+干擾素+抗菌和抗病毒藥物+補液+對癥治療組是治療犬細小病毒病效果的佳方法。無論在療程還是療效方面都優于B組和C組,另外,A組在人工感染前期連續3天注射了干擾素,故在臨床上發病較晚,比起B組、C組推遲1—2天發病,說明干擾素在預防病毒病上也起到了良好的效果。
四、結論